更新時間:2024-11-23
Ar 1193 感受態(tài)細胞100ul*10菌株一種常用于質??寺〉木?。其φ80lacZΔM15基因的產物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實現(xiàn)a互補,可用于藍白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩(wěn)定和高純度質粒DNA的提取。
Ar 1193 感受態(tài)細胞100ul*10以下是的訂購信息儲存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農桿菌感受態(tài)于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態(tài)時插入冰中。
2.每100 μl感受態(tài)加入0.01-1 μg質粒DNA(轉化效率較高,*次使用前做預實驗確定所加質粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
Ar 1193 感受態(tài)細胞100ul*103. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養(yǎng)基,于28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
注意事項
1. 加入質粒時體積不應大于感受態(tài)體積的1/10;質粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉化效率急劇下降;質粒增大一倍,轉化效率下降一個數量級。
Ar 1193 感受態(tài)細胞100ul*102. 混入質粒時應輕柔操作。轉化高濃度的質??上鄳獪p少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養(yǎng)不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應減少質粒用量。
4. 濃度不應高于25 μg/ml,過高的濃度不利于農桿菌生長,會降低其生長速度和轉化效率。本公司感受態(tài)計算轉化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉化效率降低到1/2。
5. 培養(yǎng)基中加入的目的是防止雜菌生長、篩選農桿菌;根據所用菌株抗性加入Ti質粒篩選抗生素可防止Ti質粒丟失,但Ti質粒篩選抗生素不利于農桿菌的轉基因操作,所以一般培養(yǎng)農桿菌時不考慮這些抗生素,Ti質粒丟失的概率極低(可以忽略)。
HSP-40 雞熱休克蛋白40 規(guī)格: 48T/96T
HSP-20 雞熱休克蛋白20 規(guī)格: 48T/96T
IgG 雞免疫球蛋白G 規(guī)格: 48T/96T
IgE 雞免疫球蛋白E 規(guī)格: 48T/96T
IgA 雞免疫球蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
Irna 雞免疫核糖核酸 規(guī)格: 48T/96T
IgY 雞卵黃免疫球蛋白 規(guī)格: 48T/96T
JE IgG 雞流行性乙型腦炎抗體IgG 規(guī)格: 48T/96T
sEPCR 雞可溶性血管內皮細胞蛋白C受體 規(guī)格: 48T/96T
sICAM-1 雞可溶性細胞間粘附分子1 規(guī)格: 48T/96T
sE-selectin 雞可溶性E選擇素 規(guī)格: 48T/96T
AT-Ⅲ 雞抗Ⅲ抗體 規(guī)格: 48T/96T
AmAC-1 雞巨噬細胞替代激活相關化學因子1 規(guī)格: 48T/96T
bFGF 雞堿性成纖維細胞生長因子 規(guī)格: 48T/96T
MYO/MB 雞肌紅蛋白 規(guī)格: 48T/96T
SIgA 雞分泌型免疫球蛋白A 規(guī)格: 48T/96T
PPP 雞蛋卵黃高磷蛋白磷酸肽 規(guī)格: 48T/96T
HSVⅡ-Ab 雞單純皰疹病毒Ⅱ型抗體 規(guī)格: 48T/96T
PRL 雞催乳素 規(guī)格: 48T/96T
FSH 雞促卵泡素 規(guī)格: 48T/96T
LH 雞促黃體激素 規(guī)格: 48T/96T
IC 雞傳染性鼻炎抗體 規(guī)格: 48T/96T
C3SP 雞補體3裂解產物 規(guī)格: 48T/96T
DEV 雞病毒性腸炎病毒 規(guī)格: 48T/96T
EGF 雞表皮生長因子 規(guī)格: 48T/96T
ALV-AG 雞白血病病毒抗原 規(guī)格: 48T/96T
PD 雞白痢抗體檢測 規(guī)格: 48T/96T
IL-4 雞白介素4 規(guī)格: 48T/96T
IL-3 雞白介素3 規(guī)格: 48T/96T
IL-2 雞白介素2 規(guī)格: 48T/96T
IL-1β 雞白介素1β 規(guī)格: 48T/96T
IL-18 雞白介素18 規(guī)格: 48T/96T
IL-17 雞白介素17 規(guī)格: 48T/96T
IL-1 雞白介素1 規(guī)格: 48T/96T
IFN-γ 雞γ干擾素 規(guī)格: 48T/96T
β-lactamase 雞β內酰胺酶 規(guī)格: 48T/96T
IFN-β/IFNB 雞β干擾素 規(guī)格: 48T/96T
α-glucosidase 雞α葡萄糖苷酶 規(guī)格: 48T/96T
IFN-α 雞α干擾素 規(guī)格: 48T/96T
NAG 雞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 規(guī)格: 48T/96T
Ar 1193 感受態(tài)細胞100ul*10 PAL 雞L苯解氨酶 規(guī)格: 48T/96T
CRP 雞C反應蛋白 規(guī)格: 48T/96T
BF 雞B因子 規(guī)格: 48T/96T
5-NT 雞5核苷酸酶 規(guī)格: 48T/96T
17-KS 雞17-酮類固醇 規(guī)格: 48T/96T
17-OHCS 雞17羥皮質類固醇 規(guī)格: 48T/96T