更新時間:2024-11-29
莫氏立克次體核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)公司相關(guān)產(chǎn)品牛腎細胞;MDBK(NBL-1)DL-叔DL-tert-Leucine>98%,BRPDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 細胞裂解液 (陽性對照) DL-賴氨酸DL-Lysine>98%,BRCL-0173NRK(大鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2DL-鹽酸鹽DL-Arginine >9
訂購信息:
產(chǎn)品名稱:莫氏立克次體核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)
規(guī)格:50T
編號:BH-P96620
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞;RAW 264.7 [RAW264.7 CEFADROXIL>950µg/mg,BR
ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 細胞裂解液 (陽性對照) D- D-pantothenate >98%,BR
CFPAC-1 胰腺癌細胞依度沙班;伊多塞班Edoxaban>99%,BR
SW 1990胰腺癌細胞系 1990 human pancreatic cancer cell line SW L-15+10%FBS牛防風素;6-甲氧基當歸素SphondinHPLC>97%
CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白6-羥基()6-Hydroxycoumarin>98%(GC),
VDR Others Mouse 小鼠 VDR / NR1I1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 大孔柱層析硅膠(300-400目,FCP Grade)Silica gel for column chromatography300-400目,層析用
rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓硅酸(>98%,BC)Silicic acid hydrate>98%,BC
rCSC, 大鼠心肌細胞 [CIP 104328;IAM 13570;ICMP 5794;NCPPB 2991]細胞 HBL-100(整合SV40 基因的上皮細胞)一氧化硅(>99%,BR)Silicon monoxide>99%,BR
T瘤細胞Jurkat亞系;Jurkat77鎢硅酸(>98%,BR)Silicotungstic acid hydrate>98%,BR
SERPINA3C Others Mouse 小鼠 SERPINA3C / Serpina3c 細胞裂解液 (陽性對照) 乙酸銀(>99%,BR)Silver acetate>99%,BR
莫氏立克次體核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)食道平滑肌細胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 Rattus鹽酸脫氧,英文名或英文縮寫:Doxycycline HCl,級別:15000~150000,液體,7條帶,規(guī)格:100毫克
牛腎細胞;MDBK(NBL-1)3,3,5-三基環(huán)(順反混合物) 3,3,5-Trimqthylcyclohqxcnol 116-0-9
PDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 細胞裂解液 (陽性對照) ACRYLAMIDE酰胺蛋白組學級白色結(jié)晶RTsigma
CL-0173NRK(大鼠腎細胞)5×106cells/瓶×2阿糖腺嘌吟,英文名或英文縮寫:Ara-A,級別:超,98%,規(guī)格:1克
HepG2細胞,肝細胞癌 T瘤細胞系,Hut-102細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3673-06-3D-本;D-2-基-3-本基;D-α-基-β-本;D-α-基氫化肉桂酸D-pxenylalanine;D-α-AMino-β-pxenylpropionic acid;(R)-(+)-pxenylalanine;(R)-2-AMino-3-pxenylpropionic acid;D-β-pxenylalanine